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博濟(jì)醫(yī)藥科技股份有限公司
股票代碼為（300404）創(chuàng)建于2002年，2015年在深圳創(chuàng)業(yè)板上市，是一家為國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥企業(yè)提供藥品、保健品、醫(yī)療器械研發(fā)與生產(chǎn)全流程“一站式”外包服務(wù)(CRO)的型高新技術(shù)企業(yè)，同也提供藥品上市許可持有人(MAH)服務(wù)。
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藥品研發(fā)“一站式”服務(wù)包括：新藥立項(xiàng)研究和活性篩選、藥學(xué)研究(含中試生產(chǎn))、藥理毒理研究、臨床用藥與模擬劑的生產(chǎn)、臨床試驗(yàn)、臨床數(shù)據(jù)管理和統(tǒng)計(jì)分析、上市后再評(píng)價(jià)、技
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公司擁有近3000平米的現(xiàn)代化辦公場(chǎng)所，匯聚了超1000名經(jīng)驗(yàn)豐富，學(xué)識(shí)淵博，思維敏捷的中高級(jí)醫(yī)藥研究人才和注冊(cè)法規(guī)專家。
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博濟(jì)醫(yī)藥始終堅(jiān)持“誠(chéng)實(shí)、守信、專業(yè)、權(quán)威”的經(jīng)營(yíng)理念，截至2020年，公司累計(jì)為客戶提供臨床研究服務(wù)800余項(xiàng)，基本涵蓋了藥物治療的各個(gè)專業(yè)領(lǐng)域;累計(jì)完成臨床前研究服務(wù)500多項(xiàng)。經(jīng)過(guò)近二十年的發(fā)展，博濟(jì)醫(yī)藥在技術(shù)實(shí)力、服務(wù)質(zhì)量、服務(wù)范圍、營(yíng)業(yè)收入、團(tuán)隊(duì)建設(shè)等方面都已躋身我國(guó)CRO公司的領(lǐng)先位置，成為我國(guó)本土大型CRO公司的龍頭企業(yè)。
公司新聞
袁來(lái)如此 | 大分子生物分析概論（十四_上）：LBA定量分析雙特異性生物藥的挑戰(zhàn)
作者：廣州博濟(jì)醫(yī)藥 時(shí)間：2021-08-18 來(lái)源：廣州博濟(jì)醫(yī)藥
     本文為系列文章《大分子生物分析概論》的第十四篇，旨在根據(jù)已發(fā)表的文獻(xiàn)資料，初步的介紹定量分析雙特異性抗體的LBA方法所面臨的挑戰(zhàn)。
 
     由于內(nèi)容篇幅較長(zhǎng)，本文將采取上下篇形式進(jìn)行推送，敬請(qǐng)垂注！《袁來(lái)如此》專欄系廣州博濟(jì)醫(yī)藥微信公眾號(hào)打造的科普學(xué)術(shù)專欄，內(nèi)容均為博濟(jì)醫(yī)藥藥物研究中心資深科學(xué)顧問(wèn)袁智博士原創(chuàng)。

 
     與傳統(tǒng)（單特異性）的生物藥相比，雙特異性生物藥對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)（PK）的表征提出了獨(dú)特的挑戰(zhàn)。在此背景下，開發(fā)生物藥的生物分析策略正在迅速演變，以支持這些不斷變化的藥物模式。


     一般說(shuō)來(lái)，生物分析策略應(yīng)根據(jù)藥物的作用機(jī)制（mechanism of action，MOA）和開發(fā)階段定制。對(duì)于 mAb 藥物，用于分析藥代/毒代動(dòng)力學(xué)（PK/TK），藥效動(dòng)力學(xué)和免疫原性的分析方法通常分別為定量分析、“游離”和“總”藥物濃度、“游離”和“總”靶標(biāo)濃度、抗藥物抗體（ADAs）和中和性 ADAs的開發(fā)和驗(yàn)證。對(duì)于具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的抗體衍生物（antibody derivatives），衍生物的每個(gè)功能域可能需要額外的一組檢測(cè)方法，從而可能導(dǎo)致測(cè)試方法的數(shù)量幾何級(jí)增長(zhǎng)。


     此外，與開發(fā)默認(rèn)沒(méi)有生物轉(zhuǎn)化（biotransformation）的mAb相比，復(fù)雜的抗體衍生物更容易發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，這意味著可能需要另一組測(cè)試方法來(lái)描述復(fù)雜抗體藥物的結(jié)構(gòu)完整性及其生物轉(zhuǎn)化后的各種產(chǎn)物（biotransformed variants）。


     配體結(jié)合式測(cè)試方法（LBA）是mAbs生物分析的主力軍，同時(shí)液相色譜-質(zhì)譜方法（LC-MS）也在近年越來(lái)越受歡迎。這兩種分析技術(shù)也主要應(yīng)用于抗體藥物及其衍生物的生物分析。

 
     由于藥物模式的復(fù)雜性，通常需要多個(gè) LBA/LC-MS 分析方法。當(dāng)每個(gè)分析方法都有特定的取樣程序，而且并非所有的檢測(cè)可以在一個(gè)生物分析實(shí)驗(yàn)室實(shí)施時(shí)，獨(dú)特的樣本采集、處理、儲(chǔ)存、運(yùn)輸和分析條件，會(huì)造成復(fù)雜的后勤需求。因此，需要設(shè)計(jì)一種生物分析策略，用于表征雙特異性分子的PK特性，并研究其體內(nèi)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系。本文提供了若干相關(guān)案例研究和監(jiān)管層面的預(yù)測(cè)。

導(dǎo)論

    近年來(lái)，蛋白質(zhì)工程和生產(chǎn)方面的進(jìn)展推動(dòng)著生物制藥行業(yè)開發(fā)越來(lái)越復(fù)雜的蛋白質(zhì)藥物，其能夠結(jié)合多個(gè)藥物治療靶標(biāo)，故能夠提高療效和/或者減少劑量，用以降低毒性，使安全風(fēng)險(xiǎn)最小化，提高用藥的方便性和依從性等。雙特異性藥物被定義為基于抗體（antibody-based）或基于框架（scaffold-based）的蛋白質(zhì)藥物，其包含一個(gè)以上的工程改造功能區(qū)域，該功能區(qū)域結(jié)合兩個(gè)或多個(gè)獨(dú)立的抗原靶點(diǎn)。本文集中關(guān)注雙特異性藥物的兩個(gè)獨(dú)特的功能域，其結(jié)合與疾病的發(fā)生和進(jìn)展相關(guān)的蛋白質(zhì)，而不考慮抗體骨（主）干（antibody backbone）的功能。


    開發(fā)雙特異性生物藥的領(lǐng)域，基于并發(fā)展了傳統(tǒng)的單分子靶點(diǎn)的抗體免疫療法的框架，正在蓬勃發(fā)展，以靶向協(xié)同的分子途徑（target synergistic molecular pathways）來(lái)更有效地治療疾病。兩種雙特異性抗體，blinatumomab（Blincyto）和catumaxomab（Removab）已經(jīng)在美國(guó)或歐盟批準(zhǔn)上市，用于腫瘤適應(yīng)癥的治療；這證明了這類藥物分子的應(yīng)用價(jià)值。目前有60多種用于癌癥和其它疾病的新型雙特異性生物藥正在臨床開發(fā)之中。


雙特異性生物藥分子


     雙特異性分子可以以各種不同的結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)，利用抗體可用的各種結(jié)合域。這些結(jié)合域包括可變重鏈(VH)、可變輕鏈(VL)、單鏈分子(ScFv)和/或抗體的Fc域，可以組合使用這些結(jié)構(gòu)域，以結(jié)合多個(gè)分子靶標(biāo)。具有多個(gè)Fab結(jié)合域的雙可變域免疫球蛋白(dual-variable domain immunoglobulin，DVD -Ig)這樣的大型免疫球蛋白分子和較小的串聯(lián)ScFv結(jié)構(gòu)域(diabody)，在分子大小和結(jié)構(gòu)上代表了兩個(gè)極端，它們都可通過(guò)各種蛋白質(zhì)工程技術(shù)生產(chǎn)出來(lái)(圖1)。

    圖1. 雙特異性分子的構(gòu)造。本圖展示了三個(gè)雙特異性抗體的例子：1. Hetero-lg；2.雙可變結(jié)構(gòu)域/dual variable domain；3.antibody-peptibody；這些代表了不同的分子大小，結(jié)構(gòu)及復(fù)雜性。



      目前的技術(shù)允許蛋白質(zhì)結(jié)合域（protein binding domains）和抗體支架（antibody scaffolding）的多種組合，形成一系列獨(dú)特的藥物模式（drug modalities）。雙特異性藥物的幾個(gè)功能類別包括：與可溶性靶標(biāo)結(jié)合以抑制或刺激相關(guān)功能、與細(xì)胞靶標(biāo)結(jié)合以拮抗或刺激相關(guān)功能、與細(xì)胞靶標(biāo)結(jié)合以招募免疫細(xì)胞以促進(jìn)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)功能。


     對(duì)雙特異性分子獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制(MOA)給藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)(PK/PD)評(píng)估，體內(nèi)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系的確定以及臨床前和臨床藥物開發(fā)階段所需的生物分析支持帶來(lái)了新的挑戰(zhàn)。


雙特異性抗體

     雙特異性抗體是通過(guò)基因工程重組生產(chǎn)的抗體，由兩個(gè)不同的結(jié)合域（two distinct binding domains）組成，能夠結(jié)合兩種不同的抗原或同一抗原的兩個(gè)不同表位。它們可以分為兩個(gè)主要類別，即帶有或缺少Fc區(qū)域的兩類。關(guān)于生物分析支持， FDA關(guān)于雙特異性抗體開發(fā)的指南指出：可能需要開發(fā)多種PK定量方法，以定量總（total），結(jié)合（bound）和未結(jié)合（unbound）的雙特異性抗體的濃度；也可能需要多個(gè)免疫原性測(cè)試方法，來(lái)測(cè)試對(duì)雙特異性抗體不同結(jié)構(gòu)域的免疫反應(yīng)。

 
 
     由于雙特異的性質(zhì)，雙特異性抗體的未結(jié)合或“游離”PK定量方法可以包括三個(gè)測(cè)定方法：一個(gè)雙功能方法同時(shí)測(cè)定兩個(gè)活性結(jié)合域（active binding domains）和兩個(gè)單功能方法分別測(cè)定二個(gè)結(jié)合域中之一。雙功能方法分別使用兩個(gè)靶標(biāo)蛋白作為捕獲和檢測(cè)試劑。單功能方法使用一個(gè)靶標(biāo)蛋白作為捕獲試劑，而使用抗人類IgG作為檢測(cè)試劑。通常，在解釋檢測(cè)結(jié)果時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎，因?yàn)閱翁禺愋苑椒ㄈ狈μ禺愋?，故也能檢測(cè)到雙功能分子。


     雙特異性抗體的定量PK分析方法面臨生物轉(zhuǎn)化（biotransformation）的重大挑戰(zhàn)，因此，通常定制開發(fā)方法以定量某個(gè)功能域生物轉(zhuǎn)化的程度。獨(dú)特的雙特異性構(gòu)造可能造成意外的生物轉(zhuǎn)化路徑，并可能使PK行為復(fù)雜化。


雙特異性生物藥的PK/PD


    雙特異性分子增加了PK建模的復(fù)雜性，例如，表征靶向介導(dǎo)的藥物處置需要考慮兩個(gè)靶點(diǎn)的表達(dá)，它們以不同的頻率出現(xiàn)在不同的細(xì)胞類型上。“游離”藥物濃度與“總”藥物濃度的定量，對(duì)于PK/PD建模至關(guān)重要，特別是當(dāng)涉及可溶性靶點(diǎn)時(shí)；但是，由于靶標(biāo)蛋白在體內(nèi)的不同表達(dá)模式（expression patterns），藥物定量分析可能會(huì)變得更加復(fù)雜。在絕大多數(shù)的臨床研究中，藥物濃度是在所謂的“中央隔室central compartment”或系統(tǒng)循環(huán)（systemic circulation）中，以血漿或血清樣本的形式，測(cè)定的，這在很大程度上是由于易于從服用藥物的受試者中取樣。根據(jù)幾十年累積的科學(xué)數(shù)據(jù)，系統(tǒng)藥物濃度（systemic drug concentrations）反映了藥物在靶標(biāo)作用部位的濃度。血液病是一個(gè)例外，但即使是血液病也通常含有固體組織的部分。系統(tǒng)藥物濃度和作用地點(diǎn)（site-of-action）的藥物濃度之間的關(guān)系會(huì)因作用地點(diǎn)的不同而不同，但適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型數(shù)據(jù)通常為人體狀況提供了可靠的模型。

 
     由于藥理學(xué)或藥效學(xué)響應(yīng)依賴于全身藥物濃度，正確理解PK-PD關(guān)系對(duì)于預(yù)測(cè)達(dá)到預(yù)期響應(yīng)的劑量和暴露量極為有用。同樣重要的是，確定可能發(fā)生在每個(gè)獨(dú)特的雙特異性分子上的任何潛在的體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化（in vivo biotransformation），并徹底表征不同的藥物在暴露量和活性方面的差異。總體來(lái)說(shuō)，這些表征有助于理解藥物的暴露量-響應(yīng)關(guān)系，并提供了，基于藥物變構(gòu)體活性，優(yōu)化劑量設(shè)計(jì)方案。


    PK評(píng)估是非臨床毒理學(xué)研究和臨床開發(fā)的必然需求，在非臨床疾病模型評(píng)估中也發(fā)揮著重要作用；一般在非臨床疾病模型評(píng)估中，研究藥物劑量-響應(yīng)的特性，用以選擇先導(dǎo)藥物。非臨床毒理學(xué)研究中的全身暴露量數(shù)據(jù)，可用于確定首次對(duì)人(FIH)研究的安全起始劑量，該起始劑量是基于此類安全研究確定的暴露量余量（exposure margin）。暴露量余量由未觀察到不良反應(yīng)水平(NOAEL)的動(dòng)物暴露量與選定人體劑量的預(yù)期暴露量的比值確定，通常設(shè)定為比NOAEL預(yù)期的人體等效劑量(HED)低10倍。由于雙特異性分子可靶向多種生理或病理途徑，因而可能具有更強(qiáng)的藥理和/或毒理學(xué)作用；故監(jiān)管機(jī)構(gòu)可能要求制藥商使用“最低預(yù)期生物效應(yīng)水平”（MABEL）模型來(lái)選擇FIH劑量,這意味著需要比基于NOAEL更低的起始劑量。臨床研究中較低的起始劑量，意味著可能需要提高PK方法的靈敏度；考慮到雙特異性分子的復(fù)雜性，這可能是一個(gè)挑戰(zhàn)。

 
PK定量分析方法

 
    為了支持符合藥物預(yù)期用途的PK數(shù)據(jù)的可靠性和有效性，監(jiān)管機(jī)構(gòu)希望制藥商，對(duì)所有的GLP研究/關(guān)鍵臨床試驗(yàn)，使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的分析方法來(lái)定量藥物濃度。監(jiān)管部門為生物分析方法的驗(yàn)證提供了具體的指南，這些指南在全球各監(jiān)管機(jī)構(gòu)中普遍一致。這些指南文件清楚地闡明了對(duì)分析方法參數(shù)的性能及其可接受值的監(jiān)管期望，包括收集，儲(chǔ)存和分析過(guò)程中研究樣本的完整性。關(guān)于檢測(cè)試劑的討論，特別是捕獲和檢測(cè)試劑的選擇，分析格式和技術(shù)平臺(tái)，以及用于PK表征和PK/PD相關(guān)性分析的相關(guān)待測(cè)物，都可以在科學(xué)文獻(xiàn)中找到。對(duì)于靶標(biāo)在血液循環(huán)中的藥物（這些靶標(biāo)可在血清或血漿樣本中形成藥物-靶標(biāo)復(fù)合物），關(guān)于應(yīng)當(dāng)測(cè)定的最相關(guān)的藥物形式(不包括生物轉(zhuǎn)化物/ biotransformants)仍然存在爭(zhēng)議:“總體”(結(jié)合了 + 未結(jié)合靶標(biāo)的藥物)或“游離部分”或“活性部分”(未結(jié)合靶標(biāo)的部分)。關(guān)于總藥物濃度和游離藥物濃度的問(wèn)題最好根據(jù)靶標(biāo)的已知狀況，藥物的MOA和特征，項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)的意見(jiàn)，技術(shù)可行性，以及監(jiān)管反饋（如果需要的話），按個(gè)案處理的原則解決。最近有文獻(xiàn)討論了相關(guān)問(wèn)題。


LBA定量方法


   生物分析策略的選擇可以根據(jù)藥物特定的開發(fā)階段而有所不同。例如,在非臨床物種中研究人類蛋白藥物, 使用不與非人類物種交叉反應(yīng)的，針對(duì)人類蛋白的試劑，特別是非人靈長(zhǎng)類同源物，例如,重組人源化單克隆抗體（recombinant humanized monoclonal antibody，rhuMabs）,可以開發(fā)一種通用的，快速且經(jīng)濟(jì)的PK分析方法來(lái)測(cè)定總藥物濃度，以支持全面的毒理學(xué)評(píng)價(jià)。然而,這種方法不能用在臨床研究中,更加藥物特異性試劑，例如，靶標(biāo)抗體和anti-idiotypic抗體，更可能是必要的：使用通用試劑與內(nèi)源性分子發(fā)生交叉反應(yīng)會(huì)干擾蛋白藥物濃度的定量，而測(cè)定游離藥物的濃度與建立PK-PD關(guān)系息息相關(guān)。非臨床和臨床生物分析策略的另一個(gè)問(wèn)題是，使用針對(duì)每個(gè)靶標(biāo)結(jié)合位點(diǎn)（target binding site）的試劑，例如針對(duì)每個(gè)靶標(biāo)結(jié)合域的靶標(biāo)和/或anti-idiotypic抗體的組合，來(lái)測(cè)定完整的雙特異性分子是否最有價(jià)值。

Anti-idiotypic 抗體

   當(dāng)一種抗體與另一種抗體的idiotope結(jié)合時(shí)，它被稱為抗idiotope抗體。抗體的可變部分，包括獨(dú)特的抗原結(jié)合位點(diǎn)，被稱為idiotope。Idiotopes內(nèi)的表位組合對(duì)于每種抗體都是獨(dú)一無(wú)二的(圖2).由于目前開發(fā)的大多數(shù)單克隆抗體藥物是人源的或人源化的，因此最可能誘導(dǎo)抗藥物抗體（ADA）的免疫原性表位（immunogenic epitopes），存在于提供大多數(shù)結(jié)合接觸面（binding contacts）的hypervariable complementarity determining regions（CDR）之內(nèi)。可以生成抗idiotypic抗體，特異性地結(jié)合一個(gè)單克隆抗體藥物。這些高度特異性的抗體可用于，以不同測(cè)試格式，開發(fā)藥代動(dòng)力學(xué)（PK）定量方法，以測(cè)定臨床前和臨床樣本中的游離藥或總藥物的濃度，或在ADA測(cè)試中作為陽(yáng)性對(duì)照等。

圖2. 抗體idiotope：抗體可變區(qū)域的，獨(dú)特的抗原決定因素（antigenic determinants）的集合。



    在這方面，藥物的MOA在選擇合適的分析方法時(shí)很重要，特別是在藥物活性依賴于雙特異性藥物對(duì)兩個(gè)靶點(diǎn)的同時(shí)作用的情況下?？笴D3/抗腫瘤靶標(biāo)雙特異性藥物就是一個(gè)例子：測(cè)定完整的，有活性的雙特異性分子是充分表征該藥物的最佳策略。反之，如果藥物活性依賴于一個(gè)靶點(diǎn)的參與，而另一個(gè)靶點(diǎn)的參與只是增強(qiáng)了藥物活性, 那么，測(cè)定完整藥物可能就不那么重要了；此時(shí)，只使用一種藥物特異性試劑 (例如，單臂靶向/1-arm target，單臂/1-arm延長(zhǎng) PK或增加暴露量) 可能是合理的策略。另一種方法的一個(gè)例子是評(píng)估catumaxomab抗體的PK: 該P(yáng)K分析方法利用了該抗體藥物是小鼠/大鼠的嵌合結(jié)構(gòu)體，使用了特異性的antispecies immunoglobulin的捕獲/檢測(cè)試劑。這里，使用了一個(gè)針對(duì)藥物的嵌合結(jié)構(gòu)的混合通用分析格式（mixed generic assay format）；該方法特異性來(lái)自嵌合結(jié)構(gòu)，而不涉及CDRs。這種方法基于兩個(gè)假設(shè): 首先，單克隆抗體(mAb)藥物在體內(nèi)通常非常穩(wěn)定。其次，靶標(biāo)蛋白沒(méi)有可檢測(cè)到的可溶性形式。因此，該P(yáng)K分析方法可以測(cè)定血液循環(huán)中游離的catumaxomab單抗，這是符合其預(yù)期用途的。一般來(lái)說(shuō)，默認(rèn)的生物分析策略是利用雙特異性藥物的雙特異性，但需要認(rèn)識(shí)到開發(fā)這樣的試劑是耗時(shí)的和有挑戰(zhàn)的；并且可能在藥物發(fā)現(xiàn)甚至非臨床研究階段還沒(méi)有這樣的試劑。下面將更詳細(xì)地考量各種選擇。

PK定量方法的設(shè)計(jì)

完整雙特異性分子的分析方法

 
    完整雙特異性分子定量的目的是測(cè)定生物基質(zhì)中完整的雙特異性分子。該測(cè)試只測(cè)定有活性雙特異性分子，其沒(méi)有任何功能區(qū)域被抗藥物抗體(ADA)或血液循環(huán)中的靶點(diǎn)切斷（clipped off）或阻斷（blocked）。完整分子的檢測(cè)方法通常需要使用靶標(biāo)抗體和/或anti-idiotypic抗體，以測(cè)定包含可結(jié)合捕獲和檢測(cè)試劑這兩個(gè)功能域的分子。在評(píng)估體內(nèi)或體外穩(wěn)定性時(shí)(假設(shè)試劑可用)，建議采用完整分子的分析方法。完整分子定量的測(cè)試格式如圖3A所示。

 
     這種測(cè)試格式使用兩個(gè)靶標(biāo)分子或兩個(gè)完全中和性的anti-idiotypic抗體，或兩者的組合。最近， LC-MS，結(jié)合affinity pull-down（使用靶標(biāo)或anti-idiotypic抗體）以分離待測(cè)物，已用于表征的生物基質(zhì)中的藥物完整分子。Affinity pull-down是一種類似于免疫沉淀（immunoprecipitation）的小規(guī)模親和純化技術(shù)，只是抗體也可以被其它親和系統(tǒng)所取代。

 
     這是一種sequential方法：首先，使用anti-idotypic抗體來(lái)下拉（pull down）雙特異性藥物的游離形式；然后，用LC-MS法進(jìn)行定量。利用這種形式，可以確定雙特異性分子的游離濃度。然而，在方法開發(fā)過(guò)程中需要考慮幾個(gè)關(guān)鍵因素:

 
     該測(cè)試格式必須設(shè)計(jì)好，以避免潛在的空間位阻效應(yīng)（steric hindrance）。一些雙特異性分子被設(shè)計(jì)為靶向一個(gè)可溶性分子和一個(gè)與細(xì)胞結(jié)合的分子(細(xì)胞表面受體)。這種雙特異性分子被明確設(shè)計(jì)為與兩個(gè)靶點(diǎn)同時(shí)相互作用，以發(fā)揮其預(yù)期的藥理活性。然而，雙特異性分子和檢測(cè)試劑在檢測(cè)環(huán)境中可能有不同的相互作用，換句話說(shuō)，在塑料容器表面可能表現(xiàn)出不同的相互作用。因此，應(yīng)該理解和謹(jǐn)慎的處理空間位阻效應(yīng)。例如，從位阻效應(yīng)研究中收集的數(shù)據(jù)，例如，在Octet平臺(tái)上考查域結(jié)合干擾（domain binding interferences）的數(shù)據(jù)，可能指向選擇一個(gè)特定的捕獲和檢測(cè)順序，以避免不必要的空間位阻效應(yīng);


     一些雙特異性分子，通過(guò)協(xié)同作用，具有很高的藥效學(xué)效力（highly pharmacologically potent），這可能意味著只需要非常低的臨床劑量。因此, 基于已知的劑量-響應(yīng)數(shù)據(jù)和劑量模型（dose modelling）的分析方法靈敏度將會(huì)是一個(gè)重要的考量指標(biāo);


     與傳統(tǒng)的單特異性抗體相比，雙特異性分子更有可能出現(xiàn)體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化（biotransformation），即體內(nèi)不穩(wěn)定性（in vivo instability）。生物轉(zhuǎn)化不僅可能影響雙特異性分子的活性，而且還可能影響定量雙特異性分子的可靠性。因此，完全中和性，anti-idiotypic抗體或靶標(biāo)分子(圖3A)有可能允許檢測(cè)潛在的生物轉(zhuǎn)化（consequential biotransformation）;

    圖3. 用于定量雙特異性分子的不同測(cè)試格式和試劑。(A)完整分子的測(cè)定方法：使用靶標(biāo)蛋白X和靶標(biāo)蛋白Y作為檢測(cè)試劑，測(cè)定完整雙特異性分子的濃度。(B) 功能域分析：采用抗Fc抗體和靶標(biāo)Y蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域Y的濃度。(C)功能域分析：采用抗Fc抗體和X靶標(biāo)蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域X的濃度。(D)總濃度測(cè)定方法：通過(guò)使用兩種抗Fc抗體作為測(cè)試試劑來(lái)測(cè)定雙特異性分子的所有可溶形式。

    與單特異性生物藥分子類似，如常規(guī)的單克隆抗體，ADA可以通過(guò)阻斷捕獲或檢測(cè)試劑與藥物的結(jié)合來(lái)干擾對(duì)雙特異性分子的定量(注意不要與改變的藥物清除率相混淆)。此外，一個(gè)結(jié)構(gòu)域可能是immunodominant；那么取決于測(cè)試格式，這可能會(huì)導(dǎo)致PK分析結(jié)果的差異。另外，也許除了內(nèi)源性的IgG4分子之外，雙特異性分子所固有的新穎，非天然結(jié)構(gòu)，可能使雙特異性分子比單特異性分子更容易誘發(fā)ADA反應(yīng)，這是免疫原性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的一個(gè)考慮因素。


功能域分析（functional domain assay）


     功能域分析是測(cè)定一個(gè)功能域的濃度，此格式可用于展示相關(guān)的單一功能域的濃度。當(dāng)雙特異性的MOA使得藥物分子的一部分（a partial molecule）保留部分活性時(shí)(如可溶性靶標(biāo)，融合蛋白，或肽激動(dòng)劑)，這些檢測(cè)顯得尤為重要。功能域分析的目的是確定哪個(gè)功能域是有活性的，因此，可用于解釋與ADA的形成或生物轉(zhuǎn)化相關(guān)的功能喪失。


     單域測(cè)試格式的設(shè)計(jì)如圖3B和3C所示。該方法特意使用藥物靶標(biāo)，或抑制性anti-idiotypic抗體來(lái)分析雙特異性分子的游離結(jié)構(gòu)域（free domain）， 并與抗Fc或抗框架（anti-framework）抗體，作為捕獲或檢測(cè)試劑，聯(lián)用。這些分析方法可用于藥物開發(fā)的任何階段。有時(shí)，基于細(xì)胞的測(cè)試方法可以用于測(cè)量單個(gè)功能域，如blinatumomab情況。


     圖3. 用于定量雙特異性分子的不同測(cè)試格式和試劑。(A)完整分子的測(cè)定方法：使用靶標(biāo)蛋白X和靶標(biāo)蛋白Y作為檢測(cè)試劑，測(cè)定完整雙特異性分子的濃度。(B) 功能域分析：采用抗Fc抗體和靶標(biāo)Y蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域Y的濃度。(C)功能域分析：采用抗Fc抗體和X靶標(biāo)蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域X的濃度。(D)總濃度測(cè)定方法：通過(guò)使用兩種抗Fc抗體作為測(cè)試試劑來(lái)測(cè)定雙特異性分子的所有可溶形式。



總濃度分析方法（total assay）

 
     總體測(cè)定法（total assay）用于測(cè)定雙特異性分子的所有可溶形式。這種測(cè)試格式可用于顯示雙特異性分子的存在，而不考慮任何結(jié)構(gòu)或功能的變化。該分析方法通常用于測(cè)定蛋白質(zhì)的主（骨）干（backbone）結(jié)構(gòu)，如Fc結(jié)構(gòu)域。但這可能并不適用于所有的構(gòu)造；取決于構(gòu)造的性質(zhì)，也不一定適用于所有的分子變構(gòu)體，例如，在臨床研究中rhuMab雙特異性藥物?？傮w測(cè)定法應(yīng)當(dāng)耐受ADA和與靶標(biāo)的結(jié)合（target binding）。圖3D描述了總體測(cè)定法，其中兩個(gè)與不同表位結(jié)合的抗人Fc抗體可以用作捕獲和檢測(cè)試劑。


 
    圖3. 用于定量雙特異性分子的不同測(cè)試格式和試劑。(A)完整分子的測(cè)定方法：使用靶標(biāo)蛋白X和靶標(biāo)蛋白Y作為檢測(cè)試劑，測(cè)定完整雙特異性分子的濃度。(B) 功能域分析：采用抗Fc抗體和靶標(biāo)Y蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域Y的濃度。(C)功能域分析：采用抗Fc抗體和X靶標(biāo)蛋白作為檢測(cè)試劑來(lái)測(cè)量功能域X的濃度。(D)總濃度測(cè)定方法：通過(guò)使用兩種抗Fc抗體作為測(cè)試試劑來(lái)測(cè)定雙特異性分子的所有可溶形式。




    同樣，單一多克隆抗人IgG試劑也可用作捕獲和檢測(cè)試劑。但此方法只用于非臨床研究。對(duì)于測(cè)量總體藥物濃度， LC-MS非常有用，特別是當(dāng)沒(méi)有特定的試劑可用時(shí)。總體測(cè)定法可與“完整intact”或“有效active”藥物測(cè)定法，結(jié)合使用，或同時(shí)使用兩者，以評(píng)估體內(nèi)外（in vivo /ex vivo）的穩(wěn)定性，以及生物轉(zhuǎn)化（biotransformation）對(duì)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系的影響，例如，某些deamidation或氧化反應(yīng)可能破壞藥物與靶標(biāo)的結(jié)合。

 
   PK樣本中生物環(huán)境的復(fù)雜性為使用哪一種定量方法增加了另一層挑戰(zhàn)。生物分析方法的應(yīng)用是從藥物發(fā)現(xiàn)和臨床前安全性評(píng)估期間的動(dòng)物研究開始的，持續(xù)到臨床開發(fā)，并延伸到上市后的生命周期管理(即附加適應(yīng)癥和/或組合療法)。正如前面所指出的，不同的分析策略可以在不同的開發(fā)階段使用；當(dāng)體內(nèi)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系確立之后，可以在藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的整個(gè)過(guò)程中開發(fā)和使用單一的定量分析方法。但是，需要對(duì)分析方法的生命周期管理有特殊考慮，以便將來(lái)自多個(gè)物種和不同目標(biāo)患者群體的PK/PD知識(shí)整合到所探索適應(yīng)癥中去。

雙特異性分子的方法驗(yàn)證和認(rèn)證（method validation & qualification）


    對(duì)雙特異性分子的方法驗(yàn)證和認(rèn)證與其他大分子一樣，包括精密度和準(zhǔn)確度，稀釋線性度，選擇性，干擾和特異性，以及穩(wěn)定性測(cè)試，以確保數(shù)據(jù)的穩(wěn)健性和完整性。然而，由于雙特異性分子的性質(zhì)，如上所述，在開發(fā)完整分子的分析方法時(shí)，對(duì)這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域的特異性和分析干擾的評(píng)估都是必要的。

特別聲明

    本文如有疏漏和誤讀相關(guān)指南和數(shù)據(jù)的地方，請(qǐng)讀者評(píng)論和指正。所有引用的原始信息和資料均來(lái)自已經(jīng)發(fā)表學(xué)術(shù)期刊, 官方網(wǎng)絡(luò)報(bào)道, 等公開渠道, 不涉及任何保密信息。參考文獻(xiàn)的選擇考慮到多樣化但也不可能完備。歡迎讀者提供有價(jià)值的文獻(xiàn)及其評(píng)估。

參考文獻(xiàn)

1.Zhu, L, et al. (2020). "Bioanalytical Challenges in Support of Complex Modalities of Antibody-Based Therapeutics." AAPS J 22(6): 130.
2.Ma, M., et al. (2019). "Bioanalytical challenges and unique considerations to support pharmacokinetic characterization of bispecific biotherapeutics." Bioanalysis 11(5): 427-435.
3.Seimetz D. Novel monoclonal antibodies for cancer treatment: the trifunctional antibody catumaxomab (removab). J. Cancer 2, 309–316 (2011).
4.Mullard A. Bispecific antibody pipeline moves beyond oncology. Nat. Rev. Drug Discov. 16(11), 666–668 (2017).
5.Diao L, Meibohm B. Tools for predicting the PK/PD of therapeutic proteins. Expert Opin. Drug Metab. Toxicol. 11(7), 1115–1125 (2015).
6.Trivedi A, et al. Clinical pharmacology and translational aspects of bispecific antibodies. Clin. Transl. Sci. 10(3), 147–162 (2017).
7.Ezan E, et al. Assessment of the metabolism of therapeutic proteins and antibodies. Expert Opin. Drug Metab. Toxicol.10(8), 1079–1091 (2014).
8.Fischer SK, et al. The assay design used for measurement of therapeutic antibody concentrations can affect pharmacokinetic parameters. Case studies. MAbs 4(5), 623–631 (2012).
9.Ruf P, et al. Pharmacokinetics, immunogenicity and bioactivity of the therapeutic antibody catumaxomab intraperitoneally administered to cancer patients. Br. J. Clin. Pharmacol. 69(6), 617–625 (2010).
10.Samineni D, et al. Impact of shed/soluble targets on the PK/PD of approved therapeutic monoclonal antibodies. Exp. Rev. Clin. Pharm. 9(12), 1557–1569 (2016).
11.Villegas VM, et al. Current advances in the treatment of neovascular age-related macular degeneration. Expert Opin. Drug Deliv. 14(2), 273–282 (2017).
12.Ruppel J, et al. Preexisting antibodies to an F(ab’)2 antibody therapeutic and novel method for immunogenicity assessment. J. Immunol. Res. 2016, 1–8 (2016).
13.Fan X, et al. Lens glutathione homeostasis: discrepancies and gaps in knowledge standing in the way of novel therapeutic approaches. Exp. Eye Res. 156, 103–111 (2017).
14.Kang L, et al. LC-MS bioanalysis of intact proteins and peptides. Biomed Chromatogr. 2020;34(1):e4633. https://doi.org/10.1002/bmc.4633.
15.Chen, J, et al. "Capillary nano-immunoassays: advancing quantitative proteomics analysis, biomarker assessment, and molecular diagnostics." Journal of translational medicine 13: 182. (2015)
16.Murphy RE, et al. Combined use of immunoassay and twodimensional liquid chromatography mass spectrometry for the detection and identification of metabolites from biotherapeutic pharmacokinetic samples. J Pharmaceut Biomed.2010;53(3):221–7. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2010.04.028.
17.He JT, et al. High resolution accurate-mass mass spectrometry enabling in-depth characterization of in vivo biotransformations for intact antibody-drug conjugates. Anal Chem. 2017;89(10):5476–83.https://doi.org/10.1021/acs.analchem.7b00408.
18.Jian WY, et al. A workflow for absolute quantitation of large therapeutic proteins in biological samples at intact level using LC-HRMS. Bioanalysis.2016;8(16):1679–91. https://doi.org/10.4155/bio-2016-0096.
19.Lanshoeft C, et al. Generic hybrid ligand binding assay liquid chromatography high resolution mass spectrometry based workflow for multiplexed human immunoglobulin G1 quantification at the intact protein level: application to preclinical pharmacokinetic studies. Anal Chem. 2017;89(4):2628–35. https://doi.org/10.1021/acs.analchem.6b04997.
20.Jin W, et al. LC-HRMS quantitation of intact antibody drug conjugate trastuzumab emtansine from rat plasma. Bioanalysis. 2018;10(11):851–62. https://doi.org/10.4155/bio-2018-0003.
21.Zhang LY, et al. Top-down LC-MS quantitation of intact denatured and native monoclonal antibodies in biological samples. Bioanalysis. 2018;10(13):1039–54. https://doi.org/10.4155/bio-2017-0282.
22.Li Y, et al. An efficient and quantitative assay for epitope-tagged therapeutic protein development with a capillary western system. Bioanalysis. 2019;11(6):471–84. https://doi.org/10.4155/bio-2018-0248.
23.Kodani M, et al. An automated immunoblot method for detection of IgG antibodies to hepatitis C virus: a potential supplemental antibody confirmatory assay. J Clin Microbiol. 2019;57(3). https://doi.org/10.1128/JCM.01567-18.


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博濟(jì)醫(yī)藥擁有一支規(guī)模龐大、專業(yè)成熟的臨床研究隊(duì)伍，可提供包括醫(yī)學(xué)、項(xiàng)目管理、監(jiān)查、稽查、數(shù)據(jù)管理和統(tǒng)計(jì)分析、生物樣本檢測(cè)在內(nèi)的臨床試驗(yàn)全流程解決方案。截至2020年，博濟(jì)醫(yī)藥服務(wù)的客戶超1000家，完成800多項(xiàng)臨床試驗(yàn)項(xiàng)目，助力客戶獲得新藥證書60多項(xiàng)、生產(chǎn)批件超過(guò)80項(xiàng)。擁有豐富的臨床試驗(yàn)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)，服務(wù)項(xiàng)目涵蓋臨床研究各個(gè)領(lǐng)域，在腫瘤、肝病、消化等創(chuàng)新藥領(lǐng)域擁有獨(dú)特的臨床服務(wù)體系。
 
博濟(jì)醫(yī)藥在全國(guó)設(shè)有40多個(gè)臨床監(jiān)查網(wǎng)點(diǎn)，與全國(guó)近600個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)展開合作，并運(yùn)用ORACLE OC/RDC及CTMS系統(tǒng)，控制臨床數(shù)據(jù)采集的及時(shí)性、管理臨床試驗(yàn)過(guò)程的規(guī)范性。

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